酶標分析儀,也稱為酶聯(lián)免疫吸附測定儀或微孔板檢測器,是一種基于酶聯(lián)免疫吸附實驗原理的高度自動化檢測設(shè)備。以下是關(guān)于酶標分析儀的工作原理及操作要領(lǐng)的詳細介紹:

一、工作原理
酶標分析儀的工作原理主要基于酶與底物的特異性反應以及光電比色法或熒光檢測法。具體來說,其工作原理如下:
特異性結(jié)合:酶標分析儀利用酶標記的抗體與待測樣品中的抗原進行特異性結(jié)合。這種結(jié)合是高度特異性的,能夠確保檢測的準確性。
信號產(chǎn)生:當酶標抗體與抗原結(jié)合后,加入特定的底物。酶會催化底物發(fā)生化學反應,產(chǎn)生顏色變化或熒光信號。這些信號與待測物質(zhì)的濃度成正比。
信號檢測:儀器通過光電比色法或熒光檢測法檢測這些信號。光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光,照射到微孔板中的待測標本上。一部分光被標本吸收,另一部分光透過標本照射到光電檢測器上。光電檢測器將這些光信號轉(zhuǎn)換成相應的電信號。
數(shù)據(jù)處理:電信號經(jīng)過一系列信號處理后送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算。*后,通過顯示器和打印機顯示或打印出檢測結(jié)果。
二、操作要領(lǐng)
為了確保酶標分析儀的準確操作和實驗結(jié)果的可靠性,以下是一些關(guān)鍵的操作要領(lǐng):
樣品準備:首先根據(jù)實驗要求,制備并稀釋待測樣品。
加樣:將樣品、標準品、陰性對照和酶標抗體等按照實驗步驟順序加入到酶標板相應的孔中。
反應孵育:在恒溫環(huán)境中(通常為37℃)孵育一段時間,使酶標抗體與樣品充分結(jié)合。
洗滌:孵育后,用洗滌液去除未結(jié)合的酶標抗體及其它非特異性物質(zhì)。
顯色:加入酶作用的底物,如有相應抗原,則酶會催化底物產(chǎn)生顏色反應或熒光反應。
終止反應與讀數(shù):在一定時間點加入終止液終止顯色反應,然后使用酶標分析儀在特定波長下讀取各孔吸光度或熒光強度,通過對比標準曲線得出樣品中目標物質(zhì)的濃度。
綜上所述,酶標分析儀的工作原理基于酶與底物的特異性反應以及光電比色法或熒光檢測法。在操作過程中,需要嚴格遵守操作規(guī)范和實驗流程,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。